第208章 上一节生物课（2 / 2）

走进实验室，熊霍尼一边戴好围裙，一边开始拟定培养流程。培养这类来源复杂的大肠杆菌，不仅需要注意营养基质的搭配，更要控制温度、ph、缓冲体系、气体交换以及代谢产物的调节，任何一个变量控制不当，都可能导致“菌落消失”“过度酸化”或“现场炸锅”。

“得从基础配比开始。”熊霍尼嘀咕着，开始进行第一步的环境模拟。

他首先在一只洁净的烧杯中滴入几滴稀释过的菌液样品，小心地避免产生气泡，以免后续影响菌落观察。

随后，他将提前消毒处理的玻璃试管垂直插入烧杯中央，再缓缓加入琼脂水溶液，这是一种常见的微生物培养基底材，具有良好的凝固性与渗透性。琼脂与水混合后需加热至沸腾以完全溶解——熊霍尼点起酒精灯，将烧杯加热煮沸几分钟，直到液体完全澄清，再熄火，让其自然冷却凝固。

“基础完成，接下来进入调节阶段。”他说着，在笔记本上快速记录每一个步骤。

为了保证大肠杆菌在整个培养周期中拥有稳定的生长环境，他决定使用经典的磷酸二氢钾与磷酸氢二钾组成的缓冲系统，它可以在ph6.0-8.0的范围内维持环境酸碱度的平衡。

不过，熊霍尼很清楚，这个缓冲系统的稳定范围有限，面对如乳酸菌等能大量产酸的微生物时，磷酸盐缓冲系统往往“力不从心”。

为了应对这种情况，他准备在培养基中添加少量碳酸钙。ca?难溶于水，不会过度提升培养液的碱性，但在微生物产生酸性代谢物时，能缓慢释放出碳酸根中和酸，同时还会释放?，既实现了ph缓冲，又为兼性厌氧的大肠杆菌营造了合适的气体环境。

此外，他还额外加入微量的Nah?，用于在酸度较高时缓慢碱化培养基，并进一步释放?气体，抑制乳酸堆积，减少因酸性过强引起的菌落退化。

熊霍尼将注意力集中到菌种本身。大肠杆菌是一种典型的兼性厌氧细菌，广泛存在于人类及温血动物的肠道中，是评估卫生条件的重要指标之一。

最适生长温度为35~37c，但在10~60c的范围内都具备一定活性；

最适ph为5.4~5.8，偏酸性环境有利于其稳态生长；

水中平均可存活72小时，但若脱水成粉末状态或保存在如牛奶、果汁等富营养介质中，则可存活更久；

大部分大肠杆菌以静息状态存在，只有在营养充足、环境适宜时，才转为活跃增殖状态。

熊霍尼将这一切条件整合后，设计了一整套“三相培养策略”：

诱导期（前24小时）：低温、低浓度培养基，激活休眠菌；

增殖期（24-48小时）：营养丰富、缓冲充分，维持恒温37c；

稳定期（48小时后）：碳源限制，ph缓冲加强，促进菌群结构稳定并开始数据采集。

教室里，200份样本被编号、标注、归类，每一份都像是一块等待唤醒的迷你生态系统。

“金火华，恒温箱调好了吗？”

“调好了，37度整！还有，你那边加钙了吗？”

“加了，奶白色沉淀刚刚好。”